Diabetologia：激活但功能受损的记忆Tregs在1型糖尿病患者进展缓慢的过程中随之扩展

从第一次消失人体内自身特异性到消失1同型哮喘诊疗征状的成效领军在老年人时期就有不太好的描绘出，多个人体内自身特异性特征性的老年人中会有70%在毒素转换后10年内患病哮喘，而随访15年的老年人这一数目减小到84%。值得注意，%诊疗1同型哮喘一半以上的同型1同型哮喘的复发机制还没有得到更进一步的科研人员。

愈发多的人开始其所用于应于系统来并不一定1同型哮喘的成效：个体在消失多种人体内自身特异性时离开第1之前，消失摄入量异常时离开第2之前，消失征状时离开第3之前。一些多发人体内自身特异性特征性的个体，在1期和2期，成效速度迟，并发展为复发的1同型哮喘。我们以后描绘出了一分组在首次验证到多种人体内自身特异性检验后至少10年无哮喘的极迟成效者，这分组病变人数少，但形态比较恰当。随后，我们注意到人体内自身蛋白质特异性CD8+T细胞会反其所在成效减迟的病变中会大体不存在，但在同类型复发和曾一度存在的哮喘病变中会很非常容易验证到。这不太可能指出，与成效病变相比较，这些病变自身免疫反其所的调节减迟。

早期科研人员指出，尽管调节性T细胞会(Treg)数量正常，但哮喘病变存在一些新功能瑕疵，其中会最主要对IL-2的反其所技能减少。此外，哮喘病变中会的效其所CD4+T细胞会不太可能对调节更具抵抗性，发挥为效其所T细胞会的抑止减弱，自然造成了的Treg和肾脏造成了的抑止Treg，以及蛋白质经历的CD4+T细胞会中会IL-2反其所减弱。本科研人员的目标是描绘出了CD4+调节性T细胞会(Treg)在一小群极减迟成效者中会的形态，他们的平均成年为43岁(31-72岁)，随访时间为18-32年。

方式：BOX科研人员是一项以人群为基础的纵向科研人员，在21岁以下复发的病变血亲中会体检1同型哮喘的危险因素。我们以后描绘出了曾一度减迟成效者的形态，他们保证多重人体内自身特异性特征性最多10年，但没有消失哮喘的诊疗征状，迟性或非开展性自身免疫。随后，10名暂时保证无哮喘并想要提供者大量血液检验的减迟成效者纳入T和B细胞会新功能分析。在以外的科研人员中会，8名迟成效者(SP分组)，中会位成年43岁(31-72岁)，18 - 32岁彼此间的人体内自身特异性特征性。所有的旁观者都位处1同型哮喘成效的1期，尽管一些人随后失去了人体内自身特异性对某些蛋白质的橘红色，然而，一名病变并未位处2期至少6年，但没有消失诊疗征状，一名病变被诊断为哮喘，该患者72岁，在采集检验检验时，其HbA1c下降到53 mmol/mol(7%)，在科研人员中会对该抑止开展了单独审计。分立外周血单个核细胞会(PBMCs)，采用多变量流式细胞会忍术和T细胞会抑止次测试审计抑止中会Treg的增益、表同型和新功能。其所用于FlowSOM和CITRUS(聚类断定、密切具体和紧接著)开展无委派聚类分析，审计Treg表同型。

结果：与卫生抑止相比较，来自迟成效体的心灵CD4+T细胞会的委派聚类看出，激活的心灵CD4+ Treg增益减小，与糖皮质激素抑止的TNFR具体蛋白质(GITR)表示减小有关。一名HbA1c下降的病变与成效减迟者和归一化的对照分组相比较，Treg曲谱大致相同。新功能分析指出，与卫生抑止相比较，来自减迟成效体的Treg介导的CD4+效其所T细胞会抑止明显受损。发挥为对效其所CD4+T细胞会CD25和CD134表示的抑止减小。

所示1 深入的表同型分析看出，CD4+Treg亚同型在迟成效配置文件中会减小。由FlowSOM填充的Treg室，涌进在来自所有抑止的活CD4+CD45RA -细胞会上。根据上标物表示断定出10个元簇:心灵T细胞会_1;心灵T cell_2;心灵T cell_3;心灵T cell_4;CD49b心灵T细胞会;HLA-DR + GITR +心灵T细胞会;CPUTreg_1;CPUTreg_2;CPUTreg_3;和CPUTreg_4。(a)其所用于9个不同Treg上标填充的10个元簇的MST。每个链表代表一个一个大(100个一个大)，更大的元一个大(10个元一个大)在链表分组四周成品。每个链表中会的糕所示声称单个上标的表示级别。(b)每个元聚类的热所示，以看出连续性上标表示。(c, d)为HD分组(c)和SP分组(d)填充所示，以及FlowSOM识别的每个元簇的覆盖层。(e-l)比起丰度为每个metacluster箱相所示(丰度> 0.05%)考虑到为HD和SP分组:CPUTreg_2 (e),CPUTreg_3 (f),CPUTreg_4 (g), HLA-DR + GITR +心灵T细胞会(h)、心灵T cell_1(i),心灵T cell_2 (j),心灵T cell_3 (k) n d CD49b心灵T细胞会(l)。黄色红色代表捐助者SP 606。**p< 0.01, Wilcoxon配对下标秩检验。此键适用于所示形部分(a)， (c)， (d)和d (e-l)

所示2 其所用于CITRUS的预测模同型断定，Treg增益的减小是成效减迟的图案。分级门控(a - f)和柑橘分析(g-k)比较SP旁观者和归一化的HD旁观者在CD4+CD45RA−T细胞会上的差别。(a)亲本CD25+ cd127 lotreg和CD25loCD127+T c e l社群的别具特色所示。CD25+ cd127lotreg被CD39和FOXP3富集，然后通过HLA-DR和GITR表示开展分立，模拟FlowSOM社群。(b) HD(黑点)和SP(杂色)分组以及抑止SP 606(黄色)中会CD25+ cd127的增益简介所示。(c-f) CD25+CD127loCD39+FOXP3+和CD25loCD127+门控子集的箱相所示;(c) HLA-DRloGITR−(CPUTreg_2)， (d) HLA-DRintGITRlo(CPUTreg_3)， (e) HLA- d RhiGITR+(CPUTreg_4)， (f) HLA- d RhiGITR+(HLA-DR+GITR+CPUT cell)。(g - i)柑桔簇螺旋由(g) CD127， (h) CD25和(i) FOXP3表示高强度纹理，箭头引人注意的簇被识别为SP和HD配置文件彼此间的不同。(j)箱相所示看出了在SP(杂色)和HD(灰点)分组中会，CITRUS心灵Treg_3和Treg_4的比起丰度(数目)。(k)直方所示看出每个簇的表同型(粉红色)和Treg上标比起表示与氛围表示(金色);上列，CPUTreg_3;下面一行，CPUTreg_4。氛围与所有其他簇中会上标的表示有关。*p< 0.05， **p< 0.01, Wilcoxon配对下标秩检验

所示3 与卫生献血者相比较，成效减迟者心灵treg的GITR减小。每个心灵CD4+T细胞会元簇(心灵T细胞会_1;心灵T cell_2;心灵T cell_3;CD49b +心灵T细胞会;HLA-DR + GITR +心灵T细胞会;CPUTreg_2;CPUTreg_3;来自FlowSOM的memory Treg_4)验证每个表示上标的变化。(a,b)来自HD (a)和S (b)配置文件的表示热所示(sp606不最主要在内)。(c,d)心灵Treg_4元簇中会所有HD(棕色)、所有SP(金色)和SP 606(黄色)的FlowSOM GITR表示串连，看出直方所示(c)和简介所示(d)。Wilcoxon配对下标秩和检验，p< 0.07(黄色)所有抑止最主要，p< 0.05(金色)抑止SP 606和归一化的HD不最主要在测试中会。(e,f) HLA-DRhiGITR+Tregs中会GITR表示，从分级门控，从所有HD(棕色)、所有SP(金色)和SP 606(黄色)串连，看出直方所示(e)和简介所示(f) *p< 0.05, Wilcoxon配对下标秩检验

所示4 来自减迟成效的CD4+ treg细胞会压制效其所CD4+T细胞会的技能减少。SP分组用金色的本站和红色声称，HD分组用黑色的本站和红色声称，黄色的本站/红色声称抑止sp606。其所用于CD4+CD25+ Treg分选试剂盒对CD4+T细胞会开展分选。CD4+CD25−(反之亦然者)被上标为CFSE, Treg按观察的数目起始。用抗CD3 /28微珠诱导细胞会，培训3天后开展流式细胞会忍术验证。(a-d)与CD4+反之亦然者比起其所的treg培训(免疫)(e-h) HD、SP或SP 606 Treg与HD反之亦然者培训。(a,b,f) CFSE抑止(a,e)和CFSE抑止平均值(b,f)。(c, d,h) CD25 (c,g)和CD134 (d,h)的抑止平均值。其所用于特征性对照(激活的响其所细胞会不含treg)计算抑止平均值。*p< 0.05， **p< 0.01， ***p< 0.001，重复测量双向方差分析。†p < 0.0 5 Bonferroni的事后多重比较测试

所示5 效其所CD4+T细胞会对减迟成效的T细胞会诱导的抑止更脆弱。SP分组用金色的本站和红色声称，HD分组用黑色的本站和红色声称，黄色的本站/红色声称抑止sp606。其所用于CD4+CD25+Treg分选试剂盒对CD4+T细胞会开展分选。CD4+CD25−(反之亦然者)被cfsel上标，treg按观察的数目起始。用抗CD3 /28微珠诱导细胞会，培训3天后开展流式细胞会忍术(CD25反染)和细胞会因子分析。HD Treg与HD、SP或sp606反之亦然者共同培训。(a,b) CFSE抑止(a)和CFSE抑止前年(b)。(c,d) CD25抑止前年(c)和CD134抑止前年(d)。(e,f) IFN-γ(e)和IL-17A (f)在共培训中会的表示。***p< 0.001， **p< 0.01，重复测量双向方差分析。†p < 0.0 5 Bonferroni的事后多重比较测试

推论：我们断定的推论是，来自减迟成效子的诱导心灵CD4+Treg在GITR表示中会得到了扩展和丰富，强调了进一步科研人员Treg在1同型哮喘不太可能性个体中会的系统性的必要性。

原文原文：

Boldison J, Long AE, Aitken RJ,et al.Activated but functionally impaired memory Tregs are expanded in slow progressors to type 1 diabetes.Diabetologia 2021 Oct 28